Генотипи вірусу папіломи людини (ДНК ВПЛ) — опис, методи виявлення


 

Об’єктом пильної уваги лікарів дерматологічного і гінекологічного профілів вважається вірус папіломи людини (ВПЛ). Статеві шляхи і шкіра, як найбільш частий ареал проживання цього патогена в організмі людини, схильні до високого ризику канцерогенезу, в залежності від персистуючого типу ДНК ВПЛ.

З тих пір, як в кінці минулого століття кількома вченими була виявлена зв’язок між інфікуванням ВПЛ і цервикальним рак, цей вірус став предметом суперечок і приводом для хвилювання серед багатьох жінок і чоловіків.

Генотипи ВПЛ

вірус ПЧ є дуже поширеним

Зростання інфікованості населення ці вірусом визначається двома причинами:

  • Зміна характеру сексуальної поведінки молодих людей: раннє дебютирование статевих контактів, значна кількість статевих партнерів.
  • Удосконалення діагностичних методів (гіпердіагностика).
  • Геном ВПЛ представлений молекулою ДНК. Залежно від послідовності нуклеотидів в цій молекулі, виділяють безліч генотипів. Завдяки сучасним молекулярно-біологічних методів вдалося ідентифікувати понад 100 генотипів вірусу. Близько 80 типів описані докладно і відомо, що кожний генотип вражає певний вид епітелію.

    Вірус має спорідненість до різних видів епітеліальної тканини (шкіра, слизові оболонки).

    Не всі вірусні частинки здатні викликати онкологічний процес. ВПЛ прийнято ділити на високоонкогенні і низкоонкогенние види:

  • До вірусів, здатних викликати рак, відносять наступні типи: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 67, 68.
  • До вірусів з низьким канцерогенним ризиком відносять: 5, 6, 7, 8, 11, 12, 14, 15, 17, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 42, 43, 44.
  • Найбільш часто високоонкогенні штами виявляють при таких захворюваннях шийного відділу матки, як ектопія, ерозія, лейкоплакія, а в 95-100% випадків їх ідентифікують при раку шийки матки.

    Генотипи вируса папилломи человека (ДНК ВПЧ) - описание, методи обнаруженияПрояви папіломавірусної інфекції:

  • Бородавки (папіломи на шкірі забезпечують генотипи 1-4, 7, 10, 26-29, 41, 48, 49, 57, 60.
  • Епидермодисплазии (передрак шкіри) сприяють генотипи 5, 8, 9, 12, 14, 15, 17, 19, 20-25, 36, 38, 47, 50.
  • Верхня частина дихальних шляхів і слизова оболонка ока – генотипи 2, 6, 11, 13, 16, 32.
  • Бородавки (кондиломи) аногенітальної області – генотипи 2, 6, 11, 16, 18, 30, 40-42, 44, 45, 54, 55, 61.
  • Цікаве за темою:  Фурункул у дитини - як вилікувати і уникнути ускладнень?

    У свою чергу, підсумком персистенції високоонкогенного ВПЛ буде рак різної локалізації:

    1. Карцинома анальної області.
    2. Злоякісна пухлина шийки матки, піхви і вульви.
    3. Рак статевого члена.
    4. Рак глотки.

    Генотипи вируса папилломи человека (ДНК ВПЧ) - описание, методи обнаружения

    16 тип ВПЛ ділять на 3 варіанти походження континентами:

    1. Азіатсько-американський.
    2. Північноамериканський.
    3. Європейський.

    Активність генів, що кодують білки трансформації здорових клітин у пухлинні, у азіатського і північноамериканського варіантів дуже висока. Порівняно з європейським варіантом, ризик раку при інфікуванні цими варіантами зростає в 11 разів.

    Сучасні методи виявлення ВПЛ

    Генотипи вируса папилломи человека (ДНК ВПЧ) - описание, методи обнаруженияОсновними методами якісного і кількісного визначення, генотипування на сьогоднішній день є:

    1. Якісна ідентифікація методом ПЛР, де встановлюється факт інфікування: визначається наявність ДНК ВПЛ різних типів у біологічному матеріалі.Аналіз ПЛР може проводитися за двома напрямами:
    2. З визначенням генотипу, коли пошук спрямований на конкретний тип і в результаті вказано, яким саме інфікований пацієнт, наприклад, 16 типу, 18 типи і т. д.
    3. Без визначення генотипу, коли встановлюється факт наявності у біологічному матеріалі пацієнта групи високоонкогенних вірусних частинок, тоді в результаті аналізу вказують присутність таких ВПЛ, без визначення конкретного генотипу. Зазвичай таке дослідження має скринінговий характер.
    4. Digene-тест з технологією hybrid capture, який представляє собою ПЛР в режимі real time з кількісним визначенням ДНК (вірусне навантаження), дослідженням експресії онкогенів для виявлення фізичного статусу ДНК.

    Кількісне визначення цього патогена (або вірусне навантаження) має велике значення в прогнозі результату інфікування. Незначна кількість віріонів здатне призвести до злоякісної трансформації.

    Діагностичні стандарти папіломавірусної інфекції

    Генотипи вируса папилломи человека (ДНК ВПЧ) - описание, методи обнаруженияпроведення колькоскопии

    Крім безпосередньої ідентифікації вірусу, його кількості, важливим є визначення змін в клітинах епітелію цервікального каналу: дослідження на наявність атипових клітин. Це досягається проведенням ПАП-тесту.

    ПАП-тест (методика Папаніколау) визначає наявність атипових клітин у цервікальному каналі. Результати тесту поділяють на 5 видів:

    1. Нормальні клітини.
    2. Ознаки запалення.
    3. Поодинокі клітини з атипією, що вимагають швидкого дослідження на рак.
    4. Наявність атипових клітин, підозрілих на злоякісний процес.
    5. Велика кількість атипових клітин, плоскоклітинний рак.
    Цікаве за темою:  Валтрекс: способи застосування, побічні ефекти, протипоказання

    Digene-тест в поєднанні з ПАП-тест є «золотим стандартом» у доклінічних методи верифікації захворювань шийки матки. При неможливості виконання Digene тіста, його замінюють методом ПЛР (якісних і кількісних).

    Додатково проводиться кольпоскопія.

    Визначення локалізації віріона в певній частині клітини (вільний стан або інтеграція) є важливим моментом діагностування захворювань, асоційованих з ВПЛ:

  • Інтегрована фаза: в ракових клітинах ДНК вірусу вбудовується в ДНК людської клітини, т. к. високоонкогенний вірус здатний до інтеграції.
  • Еписомальная фаза: ДНК низкоонкогенного ВПЛ перебуває незалежно від генома клітини господаря.
  • Визначення локалізації віріона проводиться за допомогою імуногістохімічного методу.<

    Патогенез папіломавірусної інфекції

    В слизову оболонку і епітелій молодої шкіри вірус потрапляє безперешкодно, а для впровадження в шкірний епітелій дорослої людини йому необхідні невеликі пошкодження.

    1. При попаданні вірусу в епітелій шкіри та слизових оболонок, вірусна часточка повинна досягти самого нижнього базального шару. Цей шар ще не диференційований, він є родоначальником всіх клітин епітелію. Вірус порушує правильну диференціювання клітин, призводячи до зростання трансформованих змінених клітин.
    2. У роговому шарі шкіри або поверхневому шарі слизової оболонки відбувається збирання нових віріонів – відбувається повний репродуктивний цикл ВПЛ: він повинен пройти від нижнього до верхнього шару епітелію.
    3. У верхньому шарі вірус ще не інтегрується в клітинний геном. На цій стадії імунна система здатна побороти патоген і захворювання не виникає – відбувається елімінація вірусу з організму людини.
    4. Якщо імунітет не впорався з вірусом, то, в залежності від генотипу вірусу, розвивається його персистенція, що призводить до розвитку доброякісного або злоякісного процесу.

    ВПЛ за ступенем ризику онкологічного процесу відрізняються розташуванням їх в клітці і здатності до вбудовуванню в геном людини.

    Високоонкогенні штами на етапі завершення своєї репродукції в поверхневих шарах епітелію вже володіють здатністю до інтеграції, чим і відрізняються від низкоонкогенного ВПЛ. Це забезпечується присутністю в їх ДНК особливих генів, що знаходяться в локусах Е6 і Е7. Онкобелки, кодується цими генами, нівелюють дію людських білків, що забезпечують руйнування (апоптоз) пухлинних клітин. Таким чином, атипові клітини не знищуються, а продовжують рости і розмножуватися.

    Цікаве за темою:  Фурункул в паху (на лобку): причини, ознаки і лікування

    Процес розвитку злоякісної пухлини тривалий і може займати не один десяток років.

    Варіанти результату інфікування ВПЛ високоонкогенним

    Генотипи вируса папилломи человека (ДНК ВПЧ) - описание, методи обнаружения

    В штучних умовах ВПЛ не культивується, тому механізм канцерогенезу вивчений не до кінця. Відомо, що вірусна ДНК не інтегрується з геномом клітини людини при першій зустрічі. Саме тому проти даного вірусу ефективна вакцинація. З превентивною метою проводиться вакцинація препаратами Гардасил (6, 11, 16, 18 типів) і Церварікс (16 та 18 типів).